Темнопольная
микроскопия
Метод темнопольной микроскопии основывается на
способности микроорганизменных клеток к сильному рассеиванию света. Тёмнопольный
микроскоп оснащается обычным объективом, а также специальным темнопольным
конденсором.
Основная особенность темнопольного конденсора заключается
в его центральной затемнённой части. Такая тёмнопольная вставка
препятствует появлению в объективе прямых световых лучей из осветительного
прибора. Освещение исследуемого объекта происходит только посредством косых
боковых лучей. Это создаёт так называемый эффект Тиндаля, вызывающий свечение
мельчайших объектов, попадающих в тёмное поле.
Чтобы избежать появления прямых лучей в объективе, он
должен обладать меньшей апертурой, чем используемый конденсор. Для этого
применяется объектив с диафрагмой. Тёмнопольная микроскопия обеспечивает яркое
свечение организмов на тёмном фоне, что делает их хорошо заметными при
наблюдении. Этот метод хорошо себя зарекомендовал в таких исследованиях, как диагностика
лептоспироза.
Особенности диагностики лептоспироза
Лептоспирозом, или водной лихорадкой, человек или
животные заражаются при использовании неочищенной воды, где могут содержаться
продукты жизнедеятельности переносчиков этого заболевания – мышей, полёвок,
ондатр, копытных.
Диагностирование лептоспироза затрудняется тем, что
обычно используемые при анализе анилиновые красители плохо окрашивают его
возбудителей. Поэтому наиболее эффективным для их обнаружения является
темнопольный метод.
Тёмнопольная
диагностика лептоспироза
Диагностика лептоспироза с помощью тёмного поля осуществляется
следующим образом:
- 4 мл смеси
венозной крови с двухпроцентным раствором цитрата натрия в соотношении 1:1
центрифугируются в течение получаса со скоростью 3 000 оборотов в минуту;
- то же
самое для мочи, спинномозговой жидкости или взвеси, для которой взяты
паренхиматозные органы – 2 часа при 4 000 оборотов в минуту;
- с помощью
бактериологической петли или пастеровской пипетки капля осадка наносится
на поверхность тонкого предметного стекла толщиной от 1 до 1,1 мм;
- осадок накрывается покровным
стеклом;
- на мокрый тёмнопольный
конденсор (туда, где находится его верхняя линза) наносится капля
дистиллированная вода;
- на каплю кладётся препарат.
Возбудители лептоспироза при таком препарировании видны отчётливо и образуют характерные мелкие завитки. Метод обладает чувствительностью 106 клеток на мл. и способен диагностировать данную болезнь на всех стадиях, кроме ранних.
Для диагностики лептоспироза компания БиОптик может
предложить следующие модели прямых В-200, В-300, С-400 и инвертированных BI-200 , CI-400 микроскопов.
Микроскопы «БиОптик»
явлются модульными и могут оснащаться компонентами темного поля как при
первоначальной покупке, так и в будущем. Также при неоходимости микроскопы
могут быть оснащены фазовым контрастом и люминесценцией.